Самолетни двигатели Административно право Административно право на Беларус Алгебра Архитектура Безопасност на живота Въведение в професията „психолог” Въведение в икономиката на културата Висша математика Геология Геоморфология Хидрология и хидрометрия Хидравлични системи и хидромашини История на Украйна Културология Културология Логика Маркетинг Машинен инженерство Медицинска психология Метали и метални инструменти Заваряване икономика Описателни геометрия Основи на икономически т Oria професионална безопасност Пожарна тактика процеси и структури на мисълта, Професионална психология Психология Психология на управлението на съвременната фундаментални и приложни изследвания в апаратура Социална психология социални и философски проблеми Социология Статистика теоретичните основи на компютъра автоматично управление теория теорията на вероятностите транспорт Закон Turoperator Наказателно право Наказателно-процесуалния управление модерно производство Физика физични явления Философски хладилни агрегати и екология Икономика История на икономиката Основи на икономиката Икономика на предприятията Икономическа история Икономическа теория Икономически анализ Развитие на икономиката на ЕС Спешни ситуации VKontakte Съученици My World Facebook LiveJournal Instagram

Теоретичен фон




Механизми за генетична рекомбинация на бактериална ДНК: трансформация, трансдукция, конюгация

Прокариотите не са характерни за сексуалната репродукция . Рекомбинацията в тях възниква в резултат на интрагеномични пренареждания, състоящи се в промяна на локализацията на гените в хромозомата или когато част от ДНК на донора прониква в реципиентната клетка.

В резултат на рекомбинацията се формира само един рекомбинант, чийто генотип е представен главно от реципиентния генотип с включен в него донорски фрагмент ДНК.

Генетичната рекомбинация се осъществява с участието на редица ензими в рамките на отделни гени или групи от свързани гени. Има специални гени на ges, които определят рекомбинационната способност на бактериите. Прехвърлянето на генетичен материал (хромозомни гени) от една бактерия в друга става чрез трансформация, трансдукция и конюгация. Предаване на плазмидни гени чрез трансдукция и конюгиране.

Трансформация - промяна в един тип клетка под действието на активния принцип от друг тип клетка. Явлението откри Грифит при Streptococcus pneumoniae (1928); по-късно Avery, MacLeod и MacCarthy (1944) изолират трансформиращото начало на пневмококи под формата на ДНК молекула. Това беше първото пряко доказателство, че ДНК е носител на генетична информация.

Мъртвите бактерии постоянно отделят ДНК, която може да бъде абсорбирана от други бактерии. Традиционно всяка чужда ДНК, която попадне в бактериална клетка, се разцепва чрез ендонуклеази. При определени условия такава ДНК се интегрира в бактериалния геном и го променя. Включването на плазмидна ДНК може да промени вирулентността на бактериите. Трансформацията играе второстепенна роля в обмена на генетична информация.

Трандукцията е прехвърляне на ДНК фрагмент от една клетка (донор) в друга (реципиент) с помощта на бактериофаг. Явлението е открито от Ледерберг и Зиндер (1952). Има 3 вида трансдукция:

1. неспецифична (обща) - в клетка, заразена с бактериофаг, по време на сглобяването на дъщерна популация всеки фрагмент от бактериална ДНК или плазмид може да проникне в главите на някои фаги заедно с вирусна ДНК. В този случай фагът губи част от своя геном, става дефектен и може да причини трансдукция. С тази форма на трансдукция почти всички гени могат да бъдат въведени в реципиентните клетки.

2. специфичен се характеризира със способността на фага да прехвърля определени гени от бактерия донор към реципиентна бактерия. Това се дължи на факта, че образуването на трансдуциращ бактериофаг става чрез разцепване на профага от бактериалната хромозома заедно с гените, разположени върху хромозомата в донорната клетка в близост до профага. Когато трансдуциращите фаги взаимодействат с клетките на реципиентния щам, генът на бактерията донор се включва заедно с ДНК на дефектния фаг в хромозомата на реципиентната бактерия. Бактериите, лизогенизирани от дефектен фаг, са имунизирани, подобно на всички лизогенни клетки, срещу последваща инфекция с хомоложен вирулентен фаг.




3. абортивен. ДНК фрагментът на донорната бактерия, донесен от фага, не е включен в хромозомата на реципиентната бактерия, но се намира в нейната цитоплазма и може да функционира в тази форма . По време на деленето на бактериална клетка трансдуцираният фрагмент на донора на ДНК може да бъде предаден само от една от двете дъщерни клетки, т.е. да бъде наследен еднолинейно и постепенно да бъде загубен.

Конюгацията е прехвърляне на генетичния материал на тяхната донорна клетка в клетката реципиент при тяхното кръстосване . Процесът на конюгиране в бактериите е открит за първи път от D. Lederberg и E. Taitum през 1946 г. По-късно се оказва, че клетките, носещи F-плазмид (сексуален фактор), са донори на генетичния материал. Когато F + се кръстосва с F "клетка, сексуалният фактор се предава независимо от донорската хромозома, ако плазмидът е автономен. Освен това почти всички реципиентни клетки получават F плазмида и стават F + клетки.

Етапи на конюгиране:

1. прикрепване на донорната клетка към реципиентната клетка с помощта на сексуални ворси (sex pili).

2. се образува конюгиращ мост, през който F фактор и други плазмиди, които са в автономно състояние на донорната бактерия, могат да бъдат прехвърлени от донорната клетка в реципиентната клетка.

3. Интегрирането на F плазмида в бактериалната хромозома води до разпадане на една от веригите на ДНК, което позволява прехвърляне към реципиентната клетка.



Създаване на опит за трансдукция

В стерилна епруветка се въвежда умерен фаг, получен чрез филтриране от Е. coli култура в обем от 1 мл, след това към тази епруветка се добавя 1 мл култура от бульон Е. coli, неспособна за разцепване на лактоза. Епруветката се държи в термостат за 40 минути След това направете семе върху секторите на чашата със среда Endo: умерен фаг; Е. coli lac-; от експериментална епруветка.

Изказване на опит за свързване

Култура от бульон за донори и култура от бульон реципиент в обем от 1 ml се въвеждат в отделна стерилна епруветка. Епруветката се държи в термостат за 40 минути След това се правят култури на донора, реципиента и смес от донора и реципиента на отделни сектори на минималната хранителна среда. Инкубира се 24 часа 37 ° C.

Самостоятелна работа: вземете предвид резултата от опита. За рисуване. В заключение практическото значение на това явление

Проучване на напредъка

а) умерен фаг, получен чрез облъчване с UV лъчи на лак Е. coli + (донор);

б) култура на лак E. coli (получател);

в) Ендо среда като селективна среда с лактоза за откриване на рекомбинанти на Е. coli

Получаване на преобразуващ фаг

Получател E.coli (лак)


Донор. E.coli (лак +) чист b / f


Рекомбинантно облъчване


филтриране

Чист бактериофаг

BCH 37 °, 40-60


Сряда Ендо

Заключение: __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа номер 4. Затихване. Живи атенюирани ваксини

Цел: да се разберат принципите на получаване на живи ваксини.





; Дата на добавяне: 2018-01-21 ; ; изгледи: 154 ; Публикуваните материали нарушават ли авторските права? | | Защита на личните данни | ПОРЪЧАЙТЕ РАБОТА


Не намерихте това, което търсите? Използвайте търсенето:

Най-добри поговорки: Можете да купите нещо за стипендия, но не повече ... 9189 - | 7323 - или прочетете всичко ...

2019 @ ailback.ru

Генериране на страница за: 0.003 сек.