КАТЕГОРИИ:


Астрономия- (809) Биология- (7483) Биотехнологии- (1457) Военное дело- (14632) Высокие технологии- (1363) География- (913) Геология- (1438) Государство- (451) Демография- (1065) Дом- (47672) Журналистика и СМИ- (912) Изобретательство- (14524) Иностранные языки- (4268) Информатика- (17799) Искусство- (1338) История- (13644) Компьютеры- (11121) Косметика- (55) Кулинария- (373) Культура- (8427) Лингвистика- (374) Литература- (1642) Маркетинг- (23702) Математика- (16968) Машиностроение- (1700) Медицина- (12668) Менеджмент- (24684) Механика- (15423) Науковедение- (506) Образование- (11852) Охрана труда- (3308) Педагогика- (5571) П Arhitektura- (3434) Astronomiya- (809) Biologiya- (7483) Biotehnologii- (1457) Военно дело (14632) Висока технологиите (1363) Geografiya- (913) Geologiya- (1438) на държавата (451) Demografiya- ( 1065) Къщи- (47672) журналистика и SMI- (912) Izobretatelstvo- (14524) на външните >(4268) Informatika- (17799) Iskusstvo- (1338) История- (13644) Компютри- (11121) Kosmetika- (55) Kulinariya- (373) култура (8427) Lingvistika- (374) Literatura- (1642) маркетинг-(23,702) Matematika- (16,968) инженерно (1700) медицина-(12,668) Management- (24,684) Mehanika- (15423) Naukovedenie- (506) образование-(11,852) защита truda- (3308) Pedagogika- (5571) п Политика- (7869) Право- (5454) Приборостроение- (1369) Программирование- (2801) Производство- (97182) Промышленность- (8706) Психология- (18388) Религия- (3217) Связь- (10668) Сельское хозяйство- (299) Социология- (6455) Спорт- (42831) Строительство- (4793) Торговля- (5050) Транспорт- (2929) Туризм- (1568) Физика- (3942) Философия- (17015) Финансы- (26596) Химия- (22929) Экология- (12095) Экономика- (9961) Электроника- (8441) Электротехника- (4623) Энергетика- (12629) Юриспруденция- (1492) Ядерная техника- (1748) oligrafiya- (1312) Politika- (7869) Лево- (5454) Priborostroenie- (1369) Programmirovanie- (2801) производствено (97182) от промишлеността (8706) Psihologiya- (18,388) Religiya- (3217) с комуникацията (10668) Agriculture- (299) Sotsiologiya- (6455) спортно-(42,831) Изграждане, (4793) Torgovlya- (5050) превозът (2929) Turizm- (1568) физик (3942) Filosofiya- (17015) Finansy- (26596 ) химия (22929) Ekologiya- (12095) Ekonomika- (9961) Telephones- (8441) Elektrotehnika- (4623) Мощност инженерно (12629) Yurisprudentsiya- (1492) ядрена technics- (1748)

имунни отговори

Имунните реакции (серологични реакции), наречени действие между антигени и антитела, води до образуване на имунен комплекс (антиген-антитяло). Те се появяват, обикновено в два етапа, в присъствието на допълнителен фактор (електролит, комплемент, или фагоцитната и др.). Специфична фаза (невидима "химически") е много бързо и се характеризира чрез съединение с група антиген детерминанта активен център антитяло Резултатът е комплекс губи разтворимост в изотонични разтвори, като например натриев хлорид в разтвор. Неспецифичното фаза (видим ", колоиден") е в рамките на няколко минути или часове и се характеризира с разширяване на антигена + антитялото с промяна в неговите физични свойства. Тази фаза се придружава от видими явления: утаяване, образуване флокулирана утайка, покрити суспензия частици спират движението и др.

Имунен отговор високо специфични и са широко използвани в практиката за serodiagnosis на инфекция (откриване в серума на антитела антимикробни), определяне на вида и вариант на микроб на определянето антигенната структура на други антигени (алергени, хормони, биологични образци от различен произход). Приложения имунни реакции диагностика на инфекциозни и не-инфекциозни заболявания, аптека, санитарен услуга, трансплантация на органи и тъкани (включително кръв), съдебната медицина.

Аглутинацията (PA) - това взаимодействие еритроцитите антиген (суспензия от бактерии, други клетки или частици) и антитяло - agglyutinov в изотоничен разтвор за образуване аглутини и утаяване (люспи на лепило частици).

Реакцията представлява няколко метода. Бързо приблизително RA се поставя върху предметно стъкло и се отчитат за 2-3 минути след смесване на ингредиентите и мода прозорец. По-добри резултати се получават при използването на адсорбирания и monoretseptornyh серуми, че избягва неспецифични реакции, например, със свързани бактерии чрез общи антигени. Разгъната (обемна) RA е по-точно, то се поставя в тръби и се преброяват на следващия ден. В серия от епруветки се получава последователни двукратни разреждания на серум в IPC - 1:50, 1: 100, 1: 200, 1: 400, и т.н. След това към всяка епруветка се прибавя същото количество клетъчна суспензия, центрофугират и се определя при стайна температура. Резултатът се отчита естеството на утайката и просвета на супернатанта. Аглутиниращ серумен титър че е най-високото разреждане, при която има ясно изразен реакция. RA се използва за идентифициране на микробен антигенна структура, за определяне антимикробни антитела и техните титър в серума в serodiagnosis на инфекциозни заболявания, при определяне на кръвна група и т.н.



Реакция пасивен (косвено) хемаглутинация (РНА) е вид на непреки реакции на аглутиниране, заедно с реакция koagglyutinatsii, латекс аглутинация, и др. Тези реакции са по-податливи от RA, като предварително стандартен антиген (или антитяло) е прикрепен към еритроцитите носител - еритроцити, убити микроби или латексови частици до получаване, съответно, на еритроцитите или латекс koagglyutiniruyuschie diagnosgikumy (имуноглобулин или антиген). TPHA с еритроцитите антигенен diagnostgkumom поставя в епруветки или ямки на плаката с двойни серумни разреждания (например, за идентифициране на serodiagnosis на напрежение инфекция или имунитет - за титър на антитяло). При положителна реакция след 4-20 часа свободни еритроцити седиментни образувани по цялата долната част на тръбата или ямките - "чадър". С отрицателна реакция на червените кръвни клетки образуват плътна утайка в центъра (под формата на "бутони"). PHA с имуноглобулин диагностично-Кум помисли, както и, но тя позира за бърза индикация на патогена в материала или идентифицирането на антигенна структура. Това е метод за бързо диагностициране.

Утаечна реакция (RP) - е утаяването на разтворим антиген чрез реакция с sotvetstvuet-антитяло утаечна в присъствието на електролит. Антигенът може да бъде прозрачен или хаптен протеинов разтвор, различни екстракти.

RP поза няколко метода. koltsepretsipitatsii Метод: серум с известна диагностичен утаечна в тясната тръба внимателно наслоява върху разтвор на антиген и рамките на един час, помисли за положителен отговор (при граница течност образува бяла утайка диск и се утаява бавно). Така че определено, например, антиген антракс в различни материали. метод капилярна утаяване: диаметър стъклен капилярен I мм първо се намалява до 1/3 в диагностичен серум, и след това 1/3 - антиген в разтвор, обърнати няколко пъти и се оставя в изправено положение за един ден. Зърна утаяват се утаи и събрани колони върху долната течни менискус в капиляра. Така се определя, например, С-реактивен протеин (CRP) в автоимунни заболявания, ревматоиден артрит, туберкулоза, инфаркт на миокарда (диагностичен серум утаечна да EOT получени чрез имунизиране на зайци). Методи дифундират агар тест утаяване гел: разтворите на антигени и антитела се поставят на различни места прозрачен гел, от които те дифундират до образуване на утайка при среща като бели ленти или линии. В метода на проста дифузия антиген дифундира в агар, съдържащ определена концентрация на диагностичен серум, които преди това са били въведени в не втвърдява агара. В метода на двойно дифузия на антигени и антитела в агар дупки дифузен един към друг в неутрално слой от агар.

Методът имуноелектрофореза разтвор нехомогенни антигенът е първият фракционира в агарозен гел при постоянен ток и след това канал в тялото, направени от страна на разпределителната линия запълни фракции серуми (антитела). В резултат на двойната дифузия в гел, образуван от специфични тираж дъги да се утаи линии, чиято форма зависи от качеството и количеството на антиген и антитяло фракции.

RP е с висока чувствителност, позволява да се идентифицират протеинови антигени в разреждания 1: 100 000 и по-горе, т.е. недостъпни за откриване на химически. Утаяващият серумен титър се счита за най-голямото разреждане на антиген като утаяване в контакт с него. Тази функция се свързва с антиген състояние на частици, малкият размер на молекулите. RP се използва за индикация на микробни антигени в материала от пациенти и от външната среда, определяне на различни класове имуноглобулини (диагностика и предотвратяване на инфекции и имунна недостатъчност) за откриване на фалшифициране на храна (здраве практика), за определяне на вида на кръвоносните материали и други биологични замърсители (съдебно практика).

Неутрализиране на токсин антитоксин (RN) - серологичен реакция между микробни и екзотоксин антитела, в резултат на инактивиране на токсично действие на токсина. Тя се поставя в експерименти с животни: екзотоксин за откриване в тест материал; за да се определи титърът на имунен серум противоотрова. Например, материал, съдържащ екзотоксин се смесва с известно диагностика серум (в излишък), инкубират се в продължение на 30 минути и се прилага на животните. Ако серум неутрализира токсин, отравянето и смъртта на животните там. Ако токсина не отговаря антитоксина серуми животни умират (както в контролната група от животни, които са получили една и съща без серум материал). При нормална лабораторна практика, реакцията се използва за диагностика на ботулизъм. За да се определи серум антитоксично даде същия експеримент, но вземат екзотоксин известен стандарт, сила и смесен със серум в различни съотношения. Определяне на ниската стойност на серум неутрализиращи определен брой минимални летални дози от токсин-DLM (това количество отговаря на I антитоксично единица AE серум). Серум титър се изразява количество AE или ME (антитоксични международни единици) в I мл серум. Например, аз ME дифтерия серум неутрализира 100 DLM дифтериен токсин на морско свинче.

Титруване на антитоксин серуми провежда в епруветки и - реакция на флокулация (сорт RP). Той се основава на факта, че когато се смесва екзотоксин или токсоид (например, протеин, антиген) серуми титрува с най-ранния мътност (първоначално Flock-lyatsiya) наблюдава ин витро с еквивалентното съотношение на токсина (токсоид) и антидот (т.е. I TE (Lf): I AE (IU)).

Реакция имунофлуоресценция (IF) - луминесцентен взаимодействие с антитела еритроцитите антиген и образуване на имунен комплекс нажежен. Методът се основава на способността на имуноглобулин е здраво свързан с флуорохромни (FITC, отакридин оранжеви и т.н.) без загуба на специфичност. Под действието на UV флуорохроми даде вторичния луминисценция.

При директния метод,, ако е получен на предметно стъкло и намазка на основен antigensoderzhaschego материал се прилага към него луминесцентно серум (например, анти-мор антитяло, белязано с FITC). След 30 минути за получаване контакт старателно се промива и се изследват под флуоресцентен микроскоп. Клетките Yersinia Pestis в материала по периферията светят жълто-зелен. АКО потоци във фазата на I и има редица предимства: висока чувствителност, лесен за формулировка може да се използва като метод за бързо диагностика (отговор в рамките на 1-2 часа). Той се използва за бързо откриване на бактерии в материала, както и тяхната идентификация.

Непряко Ако методът се характеризира с това, че стъклото се прилага на конвенционалните заешки антитела, които образуват комплекс с клетки невидим AH + АТ. След това получаване се промива и се обработва с светлинен: с магарешки серум (кон) при заек протеин (образува двойна светлинен комплекс). Този метод е по-икономичен, тъй като Тя използва една луминисцентна и задайте nonluminescent серуми.

Свързан имуносорбентен анализ (ELISA). Тя се основава на използването на антитела, белязани с ензим, който показва присъствието на субстрат специфичната активност в случай на образуване на антиген + антитялото имобилизирано върху твърда основа. IFA са широко използвани за определяне на различни антигени и антитела. Разработени много техники и модификации ELISA налични търговски комплекти. За определяне на антигена в тест материал (метод сандвич) първоначално производство на сорбция известни антитела на повърхността на ямките на плака полистирол, след което antigensoderzhaschy материал и след експозиция, промива старателно. След това се прибавя към ямките, съответстващи антитяло (серуми) белязани с пероксидаза от хрян или друг ензим, се промива и хромогенен субстрат се добавя (5-аминосалицилова киселина с водороден прекис или други подобни.).

При положителна реакция в продължение на 1 часа кафяво оцветяване развива интензивността на което зависи от количеството на белязани антитела, свързани в имунния комплекс. За определяне на неизвестни антитела (например да serodiagnosis на сифилис, или ХИВ инфекция) на повърхността на ямките Sorb след това се прибавя известно антиген под изследване серум, промива, се серум с антитела срещу човешки имуноглобулини, белязани с ензим и след вторичното измиване добавя хромогенен субстрат. Вземете под внимание, както добре. IFA има висока чувствителност и специфичност.

<== предишната лекция | Следващата лекция ==>
| имунни отговори

; Дата на добавяне: 01.05.2014; ; Отзиви: 866; Нарушаването на авторски права? ;


Ние ценим Вашето мнение! Беше ли полезна публикува материал? Да | не



ТЪРСЕНЕ:


Вижте също:



ailback.ru - Edu Doc (2013 - 2017) на година. Не е авторът на материала, и предоставя на студентите възможност за безплатно обучение и употреба! Най-новото допълнение , Ал IP: 66.249.93.206
Page генерирана за: 0.035 сек.