КАТЕГОРИЯ:


ЗНАЧИТЕЛЕН култивиране на микроорганизми




За да се изолира чиста култура от микроорганизми, проучване на биологичните им свойства, за да се идентифицират и да произвежда биомаса трябва да се размножават микроорганизми в лабораторията. Отглеждане, или расте, микроорганизмите могат да бъдат само за да създаде определени условия за тяхната дейност. Повечето бактерии, дрожди, гъбички, култивирани върху изкуствен медии. Рикетсии и вируси се размножават само в живи клетки, тъканни култури, в пилешки ембриони или животинско тяло на.

Изкуствен среда, използвана за култивиране на микроорганизми, трябва да отговарят на определени изисквания: да бъде лесно смилаеми, с необходимата sostavom'azotistyh и въглехидрати, витамини, необходима концентрация на сол, с определена стойност на рН (рН); притежават буферни свойства; няма оптимален потенциал редокс.

хранителната среда трябва да съдържа достатъчно количество вода се изисква да бъде стерилен, т. Е. Преди засяването не съдържа микроорганизми. източник на азот в средата може да бъде различни органични, редки - неорганични съединения. Често се добавя към протеин среда без пептон, който е продукт на частична хидролиза на протеина. Протеолитични микроорганизми като азотен материал може да се използва желатин ( "животно желе"). Източникът на въглерод в хранителната среда често са въглехидрати, алкохоли, някои органични киселини.

За получаването на изкуствени хранителни среди могат да използват различни природни продукти: мляко, кръвен серум, месо, яйчен жълтък, картофи и други органични вещества и минерални соли.

Изкуствен медии растеж до местоназначението е разделен на четири основни групи: общи, конкретни, селективни (избираем) и диференциална диагноза.

Чрез универсалната медиите включва месо пептон и месо-пептон агар, които растат много видове патогенни и не-патогенни бактерии.

Специално среда, използвана за култивиране на бактерии, не пролиферират на универсалната медии. Специалните храни включват мляко, кръвен серум, допълнен с животинска кръв, т-chyukozy и др. Те са били отглеждани лактобацили Пат Оген и други микроорганизми.

изборните (избираеми) среди е добре развито само определени видове бактерии. Тези среди са обогатяващи среда, в която учените се интересуват от формата на придружаващия бактерии расте по-бързо. Например, Kessler среда, съдържаща в състава си тинтява виолетово и жлъчката на едър рогат добитък за изборна устойчиви на тези вещества, грам-отрицателни Ешерихия коли и още селективен за чувствителни грам-положителните



бактерии.

Диференциални-диагностични носители, използвани, за да се прави разлика между определени видове бактерии в техните културни и биохимични свойства. Те включват:

среда за определяне на протеолитичната активност (месо желатин - НМН, мляко агар, и т.н.);

Околна среда за определяне на ферментация на въглехидрати (Хис среда Eido, Ploskireva и др.);

среда, за да се определи способността хемолитична (и други кръвен агар среда, допълнена с животинска кръв);

среда за определяне на редукция (намаляването) способността на микроорганизмите (Wilson-Blair среда);

Селективна среда се използва за диференциране ауксотрофен и прототрофни бактерии.

Консистенцията на хранителните среди може да бъде твърд, полу-твърд и течен. За гъста консистенция течности в течна среда се добавя 2-2.5% агар, или 10-20% от желатин. Полутечни среда получава чрез прибавяне на 0.5 до 1.0% агар. Агар (в малайски "желе") - плътна фиброзна вещество, получено от червени водорасли и е оформена във водни разтвори на гъст гел (желе). Той се състои основно от полизахариди (70-75%). Основните компоненти на високомолекулни вещества са агар и агароза agaropeptin, че не са разделени и не се усвояват от микроорганизмите. Следователно агар хранителен субстрат не се добавя към средата за изключително твърда консистенция. Агар топи във вода при 100 ° С и се втвърдява при 40-43 ° С пускането му под формата на плочи или жълтеникаво-сиво бял прах.

Осмотичните необходимите условия за живот на микроби, създадени в среда с добавяне на натриев хлорид, или комбинация от соли на натриев фосфат и калиев фосфат за живота на важни микроорганизми има реакционна среда - стойност на рН (рН), който се определя от съотношението на водород (Н +) и хидроксил ( OH) йони. Това е логаритъм на абсолютната концентрация на водородни йони.

Водородът индекс на 7.0 съответства на неутрална. В този случай, броят е равен на броя на водородните йони от хидроксил. Показател 7.0 долу показва кисела и 7.0 по-горе - да алкална. Микроорганизмите са адаптирани да растат в много широк диапазон на рН - от 2,0 до 8,5. Най сапрофитни и патогенни микроорганизми се култивират при леко алкална реакционна среда при рН 7.2-7.4. За отглеждането на млечно-кисели бактерии, дрожди и плесени изискват кисела реакция среда, рН 5.0-6.5.

В момента, много медии култура се произвеждат под формата на готова суха среда, полуготови продукти, съдържащи всички необходими съставки за живота на микроорганизми. За получаване културална среда прах се разрежда с вода, сместа се загрява, избран необходимото рН и се стерилизира.

От голямо значение за растежа и размножаването на микроорганизми върху изкуствен медии имат температурни условия. По отношение на температурните условия всички микроорганизми са разделени в три групи: психрофилен (студено-нежен), мезофилни (средно), термофилни (топлина, любов). Температурата на границата психрофили възпроизвеждане диапазона от 0 до 20 ° С, в мезофилни - от 20 до 45 ° С, от термофили - 45-70 ° С

Когато земеделски култури, отглеждани в аеробни инкубатори по въздух кислород, т.е.. Д. При нормални условия. Култивиране на анаероби създават аноксични условия, които могат да бъдат постигнати чрез физични, химични и биологични методи. Използвайте като анаеробни термостати.

Физични методи се основават на създаването на вакуум в анаеробни специална апаратура или вакуумни сушилни в която културите, и след това създава вакуум в апарата е първото пускане.

Понякога въздух се заменя Анаеробна въглероден диоксид, азот или друг инертен газ. кислород в средата на културата, може да е трудно, ако култивиране анаероби дълбоко колона на хранителен агар или в запечатани стъклени тръби. Анаеробни условия могат да създават по-лесен начин: със слой от агар, изсипва върху културите на твърда среда, или с помощта на течен парафин, който обхваща течната среда (Kitty Tarotstsi сряда). Химични методи се състоят в това, че поставя ексикатора култури с химични агенти като пирогалол и основа, която е реакцията между поглъщане на кислород.

Биологичен метод се основава на едновременно култивиране на аеробни и анаеробни бактерии върху твърди хранителни среди в херметически затворен петриеви панички. В този случай кислород, консумирана от нарастващата аеробни засети на една страна на носителя, след което започва растежа на анаеробни бактерии, култура, която се състои от другата половина.