КАТЕГОРИЯ:


Астрономия- (809) Биология- (7483) Биотехнологии- (1457) Военное дело- (14632) Высокие технологии- (1363) География- (913) Геология- (1438) Государство- (451) Демография- (1065) Дом- (47672) Журналистика и СМИ- (912) Изобретательство- (14524) Иностранные языки- (4268) Информатика- (17799) Искусство- (1338) История- (13644) Компьютеры- (11121) Косметика- (55) Кулинария- (373) Культура- (8427) Лингвистика- (374) Литература- (1642) Маркетинг- (23702) Математика- (16968) Машиностроение- (1700) Медицина- (12668) Менеджмент- (24684) Механика- (15423) Науковедение- (506) Образование- (11852) Охрана труда- (3308) Педагогика- (5571) Полиграфия- (1312) Политика- (7869) Право- (5454) Приборостроение- (1369) Программирование- (2801) Производство- (97182) Промышленность- (8706) Психология- (18388) Религия- (3217) Связь- (10668) Сельское хозяйство- (299) Социология- (6455) Спорт- (42831) Строительство- (4793) Торговля- (5050) Транспорт- (2929) Туризм- (1568) Физика- (3942) Философия- (17015) Финансы- (26596) Химия- (22929) Экология- (12095) Экономика- (9961) Электроника- (8441) Электротехника- (4623) Энергетика- (12629) Юриспруденция- (1492) Ядерная техника- (1748) Arhitektura- (3434) Astronomiya- (809) Biologiya- (7483) Biotehnologii- (1457) Военни бизнесмен (14632) Висока technologies- (1363) Geografiya- (913) Geologiya- (1438) на държавата (451) Demografiya- ( 1065) Къща- (47672) журналистика и смирен (912) Izobretatelstvo- (14524) външен >(4268) Informatika- (17799) Iskusstvo- (1338) историята е (13644) Компютри- (11,121) Kosmetika- (55) Kulinariya- (373) културата е (8427) Lingvistika- (374) Literatura- (1642) маркетинг-(23702) математиците на (16968) Механична инженерно (1700) медицина-(12668) Management- (24684) Mehanika- (15423) Naukovedenie- (506) образователна (11852) truda- сигурност (3308) Pedagogika- (5571) Poligrafiya- (1312) Politika- (7869) Лево- (5454) Priborostroenie- (1369) Programmirovanie- (2801) производствено (97 182 ) индустрия- (8706) Psihologiya- (18388) Religiya- (3217) Svyaz (10668) Agriculture- (299) Sotsiologiya- (6455) на (42831) спортист строително (4793) Torgovlya- (5050) транспорт ( 2929) Turizm- (1568) физик (3942) Filosofiya- (17015) Finansy- (26596) химия (22929) Ekologiya- (12095) Ekonomika- (9961) Electronics- (8441) Elektrotehnika- (4623) Мощност инженерно ( 12629) Yurisprudentsiya- (1492) ядрена technics- (1748)

Transgendіk zhanuarlar




реакция Polimerazdy-tіzbektі

Polimerazdy shynzhyrly-реакция (PCR) - ин витро zhaғdayynda DNҚ tіzbekterіnің kөp sanyn zhasauғa arnalғan реакция. PCR өtkіzu ushin kelesі himiyalyқ komponentter Болу Kerek: sintetikalyқ oligonukleotidtyқ үlgіler (20 nukleotidten әr bіreүі) DNҚ полимераза, дезоксирибонуклеотиден tөrt.

Zhұmystardyң bәrі Автоматични kөmegіmen өtkіzіledі. Bir цикъл sozylady 3-5 минути.

PCR - tsikldy үdіrіs, USH kezeңdі өtedі:

Денатурация. DNҚ үlgіsіn 95 graduska deyіn zhylytu. Реакция 1 минути zhүredі.

Ренатуриране. Қospanyң temperaturasy aқyryndap 55 gradusқa deyіn suytylady. Nukleotidtyқ paralar zharatylady.

Синтез. Температура 75 graduska kөterіledі. DNҚ полимераза zhұmys іsteuge қolayly zhaғday tұdyrylady. DNҚ sintezі bastalady.

PCR - molekulyarly biotehnologiyada процедура keң taralғan. Adamnyң, zhanuarlardyң aғzalarynda, өsіmdіkterde patogendyқ gendі sұryptau ushin, mutatsiyalardy табу ushin, sintetikalyқ oligonukleotidterden bүtіn genderdі Kurastyru ushin koldanatyn реакция.

Zhasұshaly tehnologiyalar малък sharuashylyқta

Възпроизвеждането zhasұshalar deңgeyіnde zhanuarlardyң genotipterіn биотехнологиите әdіsterіmen DNҚғa (молекулни deңgeyіnde retteүmen) yadroғa (ядро deңgeyіnde retteүmen) Немес blastomeralarғa (zhasұsha deңgeyіnde retteүmen) әser etіp өzgertedі.

Molekulyarly deңgeyde retteүde transgendyқ zhanuarlardy трансгенни әdіsіmen rDNҚmen қoldanyp ALADI. Yadrolyқ mikrozhұmystarda klondalғan zhanuarlardy алуминий maқsatymen yadrolardy сом zhasұshalardan bөlіp Alyp zhұmyrtқa zhasұshalaryna kөshіredі. Al bүkіl zhasұshanyң deңgeyіnde mikrozhұmystar өtkіzgende ұryқtarғa әser etіp дисекция (разполовяване) әdіsіnің kөmegіmen monozigottyқ zhanuarlardy ALADI Немес әr tүrlі genotipterge қatysty blastomeralardy қosyp himeralyқ zhanuarlardy ALADI.

Bir biologiyalyқ zhүyeden ekіnshі biologiyalyқ zhүyege genderdі zhasandy TACy трансгенни atalady Dep.

Zhanuarlardyң gametalarymen zhane ұryқtarymen genetikalyқ zhұmystardy kelesі biologiyalyқ erekshelіkter bolғandyқtan өtkіzedі:



1. Zhanuarlardyң molekulyarly deңgeyde erekshelіkterі - gennің negіzgі қasietterі.

2. Zhanuarlardyң zhasұshaly deңgeyde erekshelіkterі - гаметогенеза, ұryқtanu, ұryқtyң имплантиране aldyndaғy дама. Суперовулация әdіsіnің kөmegіmen ootsitterdің kerektі sanyn aluғa Bolado. Ekstrakorporaldyқ ұryқtanu әdіsіnің kөmegіmen zigotalar Alyp генетично inzheneriyalyқ құralymdardy eңgіzedі. Al ұryқtyң имплантиране aldyndaғy дама kultivirleu әdіsіn tұdyrdy. Қayta otyrtuғa тек қana biologiyalyқ tolyқ zigotalar zhane ұryқtar alynady, sondyқtan transplantatsiyaғa kultivirleu әdіsіmen transgenozdan zhaқsy shyғyp embriondar zharatқan zigotalardy ALADI.

Transgendіk zhanuarlardyң sipattamalary:

1. Genomғa bөten пол integrattalu.

2. Inektsiyadan keyіn 5-20 payyz zigotalar damuғa dayyn.

3. Transgendіk zhanuarlardy genomdarynan bөten DNҚ zhane bөten gennің ekspressiyasynyң өnіmіn (mRNҚ, rekombinanttyқ aқuyz) tauyp sұryptaydy.

4. Bөten genderdің ekspressiyasy ұlpaspetsifikalyқ sipattamalar Alyp zhүredі.

5. Eңgіzіlgen bөten gennің ekspressiyasy zhanuarlardyң fenotipterіn өzgertedі.

6. Transgendіk zhanuarlar bөten gendі ұrpaқtarғa beredі.

Maқsatyna baylanysty transgendіk zhanuarlardy ekі dәrezhege bөledі:

1. Жана өnіm aluғa arnalғan transgendіk zhanuarlar, mysaly, meditsinaғa zhane maldәrіgerlіkke қazhettі baғaly aқuyzdardy sintezdeu.

2. Baғaly selektsiyalyқ belgіlerі бар zhane zhoғary tөzіmdі transgendіk zhanuarlar.

Bіrіnshі transgendіk Жануария - tyshқan - 1976 zhyly alynғan. 1986 zhyly transgendіk қoy 1987 zhyly іrі малък Кара 1989 zhyly shoshқa alynғan. Transgendіk құstar zhane balyқtar alynғan.

Auylsharuashylyқ zhanuarlardy kөbeytkende Жана tehnologiyalarmen қoldanғan әdіsterdі eңgіzedі. Әdіsterdің bіrі - molekulyarly құralymdardy zhanuarlardyң genomdaryna kіrgіzu.

Transgendіk auylsharuashylyқ zhanuarlar

Bүgіngі kүnde auylsharuashylyқ zhanuarlardy kөbeytu zhұmystarynda Жана tehnologiyalarmen қoldanady. Bolashaғy бар әdіsterdің bіrі - molekulyarly құralymdardy zhanuarlardyң genomyna апара. Molekulyarly құralymdardy қoldanu ұstanymdary kelesі: rDNҚny ұryқtandyrylғan zhұmyrtқa zhasұshasynyң yadrosyna апара, keyіnnen солна zhұmyrtқa zhasұshasyn retsipienttің zhatyryna имплантиране zhane genomynda bөten ген бар Жануария tuu ushin transplanttaydy. Transgendіk zhanuarlardyң negіzіnde Жана genetikalyқ қatarlar алуминий zhatyr.

Biotechnology әdіsterіn қoldanғanda sүt өnіmі 14 payyzғa, а өnіmі 17 payyzғa, zhүn Алу 12 payyzғa өsedі. Zhanuarlardy klondaғanda sүt өnіmіn 20-25 payyzғa, Aluda 30 payyzғa един, zhүn Aluda 20 payyzғa, transgenozda - payyzғa 70-80, 80-90 payyzғa 40-50 payyzғa kөterүge Bolado.

Transgenozda bөten ген genomғa 5 payyz zhaғdaylarda eңgіzіledі. Transgenozdan өtken 100 payyz zigotalardan 66 payyzy biologiyalyқ tolyқtyғyn saқtaydy 40 payyzy zhatyrғa eңgіzіledі 25 payyzy tuylady. 1000 eңgіzіlgen zigotalardan 30-50 transgendіk zhanuarlar myAge.

Kәzіrgі uaқytta transgendіk siyrlardy kelesі baғyttarda қoldanady:

1) laktozany қoryta almaytyn adamdarғa arnalғan laktozasy zhoқ sүt алуминий;

2) kazeinі kөp sүt Alyp, солна sүtten sіrne Zhasa;

3) farmakologiyada monoklonaldyқ antideneler алуминий.

Klondalғan zhanuarlar

Klondau - alғashқy БЛП molekuladan, zhasұshadan Немес daraқtan kөp үlgіler алуминий protsessі. Klondalғan zhanuarlarғa БЛП daraқtan (Немес БЛП ұryқtan) shyққan genetikalyқ ұқsas aғzalardyң tobyn zhatқyzady.

Mal sharuashylyқ tәzhіribede "құrastyrylғan" zhanuarlardy алуминий tehnologiyasynyң ekі tүrі бар - tүrdің іshіnde zhane tүrlerdің arasynda. Tүrdің іshіnde "құrastyrғanda" klondalғan, tүrlerdің arasynda "құrastyrғanda" - himeralyқ zhanuarlar alynady.

Klondalғan zhanuarlardy алуминий ekі әdіsіn ayyrady:

Implantatsiyaғa dayyndalғan ұryқtyң әdіsі дисекция. Osynday әdіspen alғan zhanuarlardy monozigottyқ egіzder ataydy Dep.

Enukleardy zhұmyrtқa zhasұshalaryna сом zhasұshalarynan alynғan yadrony otyrtu.

Әdіsі дисекция. Monozigotty zhanuarlar алуминий negіzіnde totipotenttіk (әr БЛП blastomeranyң ұryқtan bөlіngende Омир sүre alatyn tұқym вземе қasietі) zhatyr, ал osynday әdіspen klondardy алуминий negіzіnde zhanuarlardyң biologiyalyқ erekshelіkterі zhatyr - БЛП zhұmyrtқaly egіzderdі табу.

Monozigotty zhanuarlardy алуминий әdіstemesі kelesі protseduralardan tұrady.

1. Ұrғashy-donordyң zhynys zholdarynan 2-8 blastomeralyқ bөlіnu kezeңіndegі ұryқtardy алуминий.

2. ясен zonasyn алуминий. Алу ekі әdіsіn ayyrady: 1) mikromanipulyarly құraldyң astynda mehanikalyқ bөlu; 2) ензим pronazanyң kөmegіmen fermentativtyқ әser ETU.

3. Ұryқty bөlek blastomeralarғa bөlu.

4. Bөlіnіp alynғan blastomeralardy enukleardyқ zhұmyrtқa zhasұshasyna inetsiyalau.

5. Құrastyrylғan ұryқty агар tsilindіrіne kіrgіzu. Агар ұrғashynyң zhynys Zholynda erіmeydі, ұryққa damuғa zhaғdaylar tұylady.

6. В виво kultivirleu.Ұryқty agarmen bіrge retsipienttің zhұmyrtқa Gmina Zolynia kіrgіzedі. Rekonstruktsiyadan өtken ұryқtardy kultivirleu ushin получател retіnde қoylarmen қoldanady. Ұryқtardy бластоцист kezeңіnedeyіn kultivirleydі. Keyіnnen лапаротомия әdіsіmen blastotsistany zhұmyrtқa zholynan Alyp, Agard Alyp tastap, ұryқty baғalaydy.

7. Biologiyalyқ tolyқ ұryқtardy ұrғashy-retsipienttің ipsilateraldyқ mүyіzshesіne eңgіzedі.

Enucleation әdіsі. Әdіs kelesі protseduralardan tұrady:

1. Ovulyatsiyadan өtken zhұmyrtқa zhasұshany donordyң reproduktivtyқ zholynan Alyp dayyndau.

2. Mikroinemen ұryқtandyrylmaғan zhұmyrtқa zhasұshany polyarly denenің astynda kesіp цитохалазин қosylғan fosfattyқ ortaғa Salado.

3. Pipetkamen polyarly denenі zhane onyң қasyndaғy tsitoplazmany БЛП saғat kultivirleuden keyіn soryp ALADI. Sonymen zhұmyrtқa zhasұshasy ekіge bөlіnedі. Polyarly denenің бар zhartysynda метафаза хромозома II kezeңіndegі бар (zhұmyrtқa zhasұshanyң "yadrolyқ" zhartysy). Ekіnshі bөlekte yadrolyқ құrylymdar zhoқ ( "enukleardyқ" zharty).

4. Zhanuarlardyң сом zhasұshalarynan bөlіp alғan yadrolardy "enukleardyқ" zhұmyrtқa zhasұshasyna Salado.

5. Elektroқosyludan keyіn ұryқtyң tsitoplazmasymen yadrony fosfattyқ buferge Salado.

6. Ұryқtardy agarғa мазнини (әdіstemesі zhoғaryda kөrsetіlgen).

7. виво kultivirleu. Retsipienttің zhұmyrtқa zholdaryna ұryқtar otyrғyzylyp 4-6 кун inkubatsiyaғa zhatady.

8. Ұryқtardy Alyp biologiyalyқ tolyқtyғyn anyқtau.

9. "Құrastyrylғan" ұryқty aқyrғy retsipientke otyrtu.

Himeralyқ zhanuarlar

Химера - БЛП Nexe embriondardyң blastomeralarynyң қosylu үdіrіsterіnen shyққan zhanuarlar. Himeralar ekі Немес Одан да kөp ұryқtanuғa dayyn tұrғan embriondardyң blastomeralarynyң қosyluymen alynady. Zhұmystar өtkіzgende genetikalyқ zhynys anyқtalmaydy, sondyқtan zhynys hromosomalaryna sәykes mozaikalar zharatylady (+ XX XX XX + XY). Genetikalyқ mozaikalardyң іshіnde fenotiptіk erkekter kөp Bolado. Gonadalardyң дама bastalғan kezde XY hromosomalardyң 30 payyz Сана gonadadan тестисите damyғanғa zhetkіlіktі. XX XY zhane hromosomdy zhasұshalar БЛП bіrіmen aralasқan kezde himeralyқ gonadalar тестисите baғytynda damidy. Al himeralyқ embrionar damyғanda zhane XX XY blastomeralar БЛП bіrіne zhaқyn bolmasa, olardyң қasynda Ана bezge sәykes хистогенеза zharatylyp, germafrodittyқ дама bastalady. Tyshқandarda БЛП Ана без zhaғynda, БЛП zhaғynda ұryқ без damyғan zhaғdaylar бар.

Himeralyқ zhanuarlar алуминий Zholdary Z. Makzaren zhane Н. Dourin zhұmystarynda zhazylғan.

Himeralar zhasaғanda ekі әdіspen қoldanady: 1) agregatsiyalyқ - БЛП ұryққa әr tүrlі genotiptі ekі Немес Одан да kөp blastomeralardy қosu; 2) inektsiyalyқ - blastotsistanyң іshіne basқa ұryқtan alynғan blastomerany kіrgіzu.

Agregatsiyalyқ әdіs. 8-12 blastomeralyқ kezeңdegі әr tүrlі genotiptі ұryқtardy ALADI. Әdіsteme kelesі protseduralardan tұrady:

2. 8-12 blastomeralyқ kezeңdegі ұryқtardy ұrғashy-donorlardyң zhynys zholdarynan алуминий. Әr tүrlі genotiptі ұryқtardy Alyp, Olard 1 мл M16 + BSA ortasynmen zhuady.

3. Bass zhaқta kөrsetіlgen әdіske sәykes бистър zonasyn алуминий.

4. M16 + BSA mikrotamshyғa salyp ekі ұryқty bіrіktіredі zhane 37 gradusta kultivirleydі. Kultivirlegen kүnі ұryқtardy пипета kөmegіmen 2-3 Ret агрегация өtu ushin БЛП bіrіne zhaқyndatady. Ұryқtar 24-48 saғat агрегация ayaқtalu ushin (бластоцист zharatylғanғa deyіn) inkubatsiyada Bolado.

5. Himeralyқ ұryқtardy ұrғashy-retsipientterdің zhynys zholdaryna transplanttaydy.

Inektsiyalyқ әdіs. Бластоцист kezeңіndegі ұryқtarmen қoldanady. Әdіsteme kelesі protseduralardan tұrady:

1. Ұrғashy-donorlardyң zhynys zholdarynan әr tүrlі бластоцист kezeңіndegі ұryқtardy алуминий. Әr tүrlі genotiptі ұryқtardy 1 мл M16 + BSA ortasymen zhuady.

2. ясен zonasyn pronazamen алуминий.

3. В витро kultivirleu (37 gradusta saғat 1).

4. Ұryқ-donordan bөlіnіp alynғan blastomeralardy ұryқ-retsipientke inektsiyalaydy.

5. Himeralyқ ұryқty 12 saғat ин витро kultivirleu.

6. Himeralyқ ұryқty ұrғashy-retsipienttің zhynys Gmina Zolynia мазнини.

Sonymen, himeralyқ zhanuarlar alғanda zhasұshalardyң gibridizatsiyasy bolmaydy. Himeralyқ zhanuarlar ұrpaқtarғa genetikalyқ мозайка қasietterіn bermeydі.