КАТЕГОРИЯ:


Астрономия- (809) Биология- (7483) Биотехнологии- (1457) Военное дело- (14632) Высокие технологии- (1363) География- (913) Геология- (1438) Государство- (451) Демография- (1065) Дом- (47672) Журналистика и СМИ- (912) Изобретательство- (14524) Иностранные языки- (4268) Информатика- (17799) Искусство- (1338) История- (13644) Компьютеры- (11121) Косметика- (55) Кулинария- (373) Культура- (8427) Лингвистика- (374) Литература- (1642) Маркетинг- (23702) Математика- (16968) Машиностроение- (1700) Медицина- (12668) Менеджмент- (24684) Механика- (15423) Науковедение- (506) Образование- (11852) Охрана труда- (3308) Педагогика- (5571) Полиграфия- (1312) Политика- (7869) Право- (5454) Приборостроение- (1369) Программирование- (2801) Производство- (97182) Промышленность- (8706) Психология- (18388) Религия- (3217) Связь- (10668) Сельское хозяйство- (299) Социология- (6455) Спорт- (42831) Строительство- (4793) Торговля- (5050) Транспорт- (2929) Туризм- (1568) Физика- (3942) Философия- (17015) Финансы- (26596) Химия- (22929) Экология- (12095) Экономика- (9961) Электроника- (8441) Электротехника- (4623) Энергетика- (12629) Юриспруденция- (1492) Ядерная техника- (1748) Arhitektura- (3434) Astronomiya- (809) Biologiya- (7483) Biotehnologii- (1457) Военни бизнесмен (14632) Висока technologies- (1363) Geografiya- (913) Geologiya- (1438) на държавата (451) Demografiya- ( 1065) Къща- (47672) журналистика и смирен (912) Izobretatelstvo- (14524) външен >(4268) Informatika- (17799) Iskusstvo- (1338) историята е (13644) Компютри- (11,121) Kosmetika- (55) Kulinariya- (373) културата е (8427) Lingvistika- (374) Literatura- (1642) маркетинг-(23702) математиците на (16968) Механична инженерно (1700) медицина-(12668) Management- (24684) Mehanika- (15423) Naukovedenie- (506) образователна (11852) truda- сигурност (3308) Pedagogika- (5571) Poligrafiya- (1312) Politika- (7869) Лево- (5454) Priborostroenie- (1369) Programmirovanie- (2801) производствено (97 182 ) индустрия- (8706) Psihologiya- (18388) Religiya- (3217) Svyaz (10668) Agriculture- (299) Sotsiologiya- (6455) на (42831) спортист строително (4793) Torgovlya- (5050) транспорт ( 2929) Turizm- (1568) физик (3942) Filosofiya- (17015) Finansy- (26596) химия (22929) Ekologiya- (12095) Ekonomika- (9961) Electronics- (8441) Elektrotehnika- (4623) Мощност инженерно ( 12629) Yurisprudentsiya- (1492) ядрена technics- (1748)

Методи за отглеждане на облигатни анаероби. Как да се създаде недостиг на кислород условия, прилаганата техника. Етапи на изолиране на чисти култури от облигатни анаероби




Силови микроорганизми. Методи за хранителни добавки към бактериалната клетка. Класификация според вида на храната. Зависимостта от един източник на въглерод и енергия. Растежни фактори.

По вид на хранителни организми се разделят на:

autotrophs - синтезиране на цялото количество въглерод-съдържащ вещество на CO2;

heterotrophs - като източник на въглерод органичен материал;

сапрофити - емисия на органична материя от мъртвите организми;

Паразити - живее за сметка на органична материя от живи клетки.

Разграничаване holozoic (абсорбция на хранителни вещества под формата на твърди частици в усвояването на специфични храносмилателните органи при животни) и golofitny (изсмукване чрез повърхността под формата на разтвори, в растения, гъби и бактерии) средства за доставка. След това, хранителните вещества трябва да бъдат получени от клетката.

Механизми за доставяне на хранителни вещества в клетка може да бъде както следва.

1. пасивна (прост) дифузията - поради разликата в концентрациите в клетката и в околната среда (много рядко, само вода, кислород, и някои йони, най друг механизъм - улеснена дифузия).

2.Oblegchennaya дифузия - и поради разликата в концентрация, но с използване на ензим-специфичен мембранен транспортери (translocase), на изхода на метаболитни продукти е същата.

3. Активна Транспорт (AT) - срещу градиент на концентрация, като се използват ензими, вектори и разходите на енергия,. Има първични антитела се използва химична енергия и вторични антитела с използване на протонната потенциална енергия (symport, antiport)

В зависимост от естеството на енергията на донори на електрони:

phototrophs (фотосинтезиращи), способни да използват слънчевата енергия - сапрофити; chemotroph (хемосинтетични) в състояние на използването на енергия от окислително-редукционни реакции - патогенни микроби.

В зависимост от донори на електрони chemotroph разделен: hemolitotrofov (chemoautotrophs) hemoorganotrofy (hemogeterotrofy)


Растежни фактори:

Аминокиселини. Много микроорганизми трябва да бъдат на определени аминокиселини (един или повече), тъй като не може да синтезира самостоятелно, например, Clostridium - левцин, тирозин; Streptococci - левцин, аргинин, и др ..

Пуринови и пиримидинови бази и техни производни. са растежни фактори за различни видове стрептококи (аденин, гуанин, цитозин, урацил, тимин, и др.); Някои азотна база, необходими за растежа на стафилококи и други бактерии.

Липидите (мастни киселини - компоненти на фосфолипиди) са необходими за растежа на някои стрептококи и микоплазма.

Витамини, главно Групи B, част от коензими. Например, Corynebacterium дифтерия, Shigella изискват или никотинова киселина, който е част от NAD и NADP;



Стафилококус ауреус, стрептококова пневмония, Brucella -да тиамин (витамин В1), която е част от пирофосфат;

Streptococcus, някои видове тетанус бацили -pantotenovoy киселина, която е част от коензим CoA и др.

За много растежни бактерии фактори е фолиева киселина, биотин, скъпоценни камъни-компонент на цитохроми (камъни, необходими хемофилни бактерии MKBtbc

2) Особености на бактериален метаболизъм: скоростта на метаболизма, обмяната на веществата на различни видове метаболитен пластичност. Яденето на бактерии. Класификация на бактерии върху видове храни. Концепцията на autotrophs, heterotrophs, сапрофити, абсолютни и факултативни паразити, прототрофия, ауксотрофи.

Метаболизъм (метаболизъм) - колекция от биохимична

реакции, проявяващи се в микробната клетка и насочени към изграждането на неговите компоненти и да му осигурява енергия. Клетъчния метаболизъм се състои от два потока от реакции, които са тясно свързани помежду си и в същото време lrotekayuschih: енергия и конструктивно.

Конструктивно метаболизъм (анаболизъм) - по-нататък в поток от реакции, насочени към изграждането вещество на клетката (биосинтеза) от малки и прости молекули, включително тези, получени от външната използване на акумулираната енергия.

Енергийния метаболизъм (катаболизъм) - поток от реакции soprovozhdayuitsiisya срутване на големи молекули в по-малките, за да се освободи енергия и съхраняване на получената енергия под формата на богати на енергия молекули - ATP, ADP. CTP (цитидин трифосфат). UTP

(Уридин трифосфат) и други, най-важните от тях са на АТР, които са допълнителни разходи за биосинтеза на активно движение. осморегулацията и други енергоемки процеси.

Основните методи за генериране на енергия за по-голямата част от микробни клетки са дишане (окислително фосфорилиране) и ферментация (субстрат фосфорилиране). И в двата случая има прехвърляне фосфорил от група на фосфорна киселина, за да ADP за образуване АТР.

Дишането на енергийната ефективност превъзхожда ферментира много пъти. По време на дишането по време на едно пълно окисление на глюкоза молекули формира 38 ATP молекули, например, когато една молекула на млечна ферментация на глюкоза само 2 ще молекули АТР киселина.

Видове храна. Микроорганизми трябва въглехидрати, азот, сяра, фосфор, калий и други елементи. В зависимост от източниците за доставка на въглеродни бактерии са разделени в autotrophs използващи да изгради своята клетка C02 въглероден диоксид и други неорганични съединения, и heterotrophs, че се хранят с готови органични съединения. Автотрофни бактерии са нитрифициращи бактерии в почвата; серни бактерии, които живеят във вода със сероводород; железни бактерии, живеещи във водата с цветни желязо и др.

Heterotrophs разполагат с органични останки от мъртви организми в околната среда, наречени сапрофити. Хетеротрофни организми, които причиняват болести при хората или животните, посочени като патогенен и благоприятна. Сред патогени намерени задължителното и факултативни паразити (от гръцките parasitos -. Използвач). Задължителни паразити могат да съществуват в клетките, например, рикетсии, протозои и някои вируси.

В зависимост от окислен субстрат, наречен електронен или водороден донор, микроорганизми са разделени в две групи. Микроорганизмите, които използват водород като донори на неорганични съединения, наречени lithotrophic-ми (от гръцките Lithos -. Stone), и микроорганизми, като се използва водород като донори органични съединения - organotrophs.

Като се има предвид източника на енергия, включително бактерии отличават phototrophs, т.е. фотосинтезата (като синьо-зелени водорасли, които използват енергията на светлината), и chemotroph изискваща химични източници на енергия.

3) физиологията на бактерии: растеж и размножаване. Начини за осъществяване на генетична информация в бактерии (особено репликация процеси, биосинтеза на протеин, като реализацията на първичния генетична информация).

Жизнената дейност, характеризиращ се с растеж на бактерии - формиране на структурни и функционални компоненти на клетката и увеличаване на самата бактериалната клетка, както и възпроизвеждане - самостоятелно възпроизвеждане, което води до увеличаване на броя на бактериални клетки в популацията.

Бактериите се размножават чрез двоичен делене половина, рядко чрез пъпкуване. Actinomycetes като гъби могат да се разпространяват спори. Actinomycetes, като разклонение бактерии се размножават чрез раздробяване на ресничестите клетки.

Растеж - последователно увеличаване на всички компоненти на клетката. В резултат на растежа на бактерии.

Възпроизвеждането на бактерии - увеличение на броя на бактериални популации. По време на растежа на бактериалната клетка се увеличи с 2-3 пъти, тя рисува интензивно и натрупаната РНК. При благоприятни условия, растежа на възпроизвеждане свършва. В бактерии репродукция се случва, като се раздели на две - двоичен делене. Това е основен метод за възпроизвеждане на бактерии.

Възпроизвеждането на бактерии. Тя започва с репликация - удвояване на генома, а след това има разделение. В бактерии, т.е. вегетативно репликация Информацията се предава от майка на клетките към дъщеря.

В бактерии, репликация саморегулираща се, така че в генома има гени, отговорни за репликация, т.е. samoreguliremy процес.

Репликацията е полу-консервативен характер. Това е, дъщерните клетки получават равномерно разпределя генетичен материал. Репликация започва в определен момент - локус ДНК. От тази гледна точка, преждата развиване ДНК, разклонението на репликация е оформен, SSB протеин се синтезира, което предотвратява усукване повтарят нишки. Процесът се осъществява с ДНК полимераза, която може да се свърже с допълнителни нуклеотиди за свободното 3 'края. Синтез на допълнителни области започва запълващ грунд. Това РНК част комплементарна ДНК матрица и грунда има свободен 3 'края. Запълващ грунд започва синтезата на ДНК, ДНК фрагменти се основава на матрица (Okazaki), които са зашити в един DNKligazami резба. Бактериалната клетка формира два еднакви направления на ДНК са отнети от полюсите на деление на клетките и тичам след репликация на бактерии. Тя започва с разширяването на цитоплазмената мембрана, той се удължава, образувана междуклетъчната дял на екватора, в който бактерията е двоичен разделя и формира две еднакви дъщерни клетки

4) Отглеждането на бактерии: условията, културна среда (тяхната класификация по предназначение). Принципи на хранителни среди. Културни свойства бактерии. Примери.

В лабораторни условия, микроорганизмите се отглеждат в хранителна среда, които трябва да бъдат стерилни, прозрачен, мокро, съдържа някои хранителни вещества (протеини, въглехидрати, витамини, микроелементи и т.н ..), притежават определен буферен капацитет, има подходящо рН, редокс потенциал. Хранителна среда последователност класифициране - течни, полу-твърд, плътен (в твърдо състояние); произход - животински или растителен произход и синтетични медии, направени от химически чисти съединения, определени в точно посочените концентрации; Предназначение - често се използва (универсален), диференциал, планова и обогатяване на околната среда, специален.

Със среща:

Нормално (прост) среда, подходяща за отглеждане на много видове патогенни и не-патогенни бактерии.

Диференциални среди позволяват на бактериите да се прави разлика между различните видове и родове на техните културни и биохимични свойства.

Избираем (селективна) среда и обогатяващо среда, която е благоприятна за развитието на бактерии и някои видове потиска растежа на други микроорганизми.

Специално среда - най-оптималния за отглеждане на бактерии, не разплод в народната медиите.

Към културата или macromorphological свойства включват характеристики на растежа на микроорганизмите на твърди и течни носители. На повърхността на гъсти хранителни среди в зависимост от посяването на микроорганизмите може да расте като колонии, инсулт или непрекъснато морава.

Colony се нарича изолирана група от клетки от един вид, отгледани от една единствена клетка (клетъчен клон)

Примери: Когато се отглеждат в течна среда на бактериите най-често причиняват дори замъглено, понякога - валежите: ронливост (стрептококи), на люспи (streptobatsilly), бульон, обаче, остава ясно. Някои бактерии образуват филм на повърхността на течната среда: суха, лющеща се, пъпчиво (туберкулозен бацил), тънък, лек (Vibrio cholerae), в насипно състояние, с излъчваща надолу процеси - "сталактити" (причинителят на чумата). Дори и по-разнообразни растежа на бактериите върху твърда хранителна среда

благоприятно, ограничаване на техния растеж и пептон бедност вода с хранителни вещества.

5) Нетни бактерии култура. Методи за изолиране на чисти култури на аеробни и анаеробни бактерии. Принципите, които се основават на тези технологии. Изолиране на чисти култури на Drygalski.

Чисти култури от бактерии, наречени население от един вид или един вид, се отглежда в хранителна среда. Много видове бактерии са разделени от една функция на биологични вариации - биоварианти. Биоварианти, които се различават в биохимични свойства, наречени ваучери пробите от, антигенни свойства - serovarami, чувствителност към фаг - fagovarami. Културата на микроорганизми от същия вид, биовариант, или изолирани от различни източници или по различно време от същия източник, наречен видове са определени номера или символи. Чисти култури от бактерии в диагностични бактериология лаборатории са получени от изолирани колонии, рекултивиране на контура в тръбата с твърдо или, по-рядко, течна хранителна среда. Чисти култури от бактерии, получени за диагностични тестове - идентификация, което се постига чрез определяне на морфологични, културни, биохимични и други характеристики на микроорганизма.

Методи за изолиране на чисти култури от бактерии.

Универсален инструмент за производство на култури е бактериална линия. В допълнение към това, за посев убождане използва специална бактериална игла, и за култури върху блюда на Петри - изработени от стъкло или метална шпатула. За култури течни материали, използвани заедно с примки и завършили Pasteur пипета. Първият предварително произведени от стерилни нетопимите стъклени тръби, които са изготвени на пламъка под формата на капилярите. В края на капилярната веднага запечатани, за да се поддържа стерилност. В Пастьор пипети и степенувани широк край е затворен с памук и след това се поставя в своите шкафове или специална хартия се увива и се стерилизира.

Когато презасяване бактериална култура вземе тръбата в лявата ръка и правото, прегръща памучен тампон IV и V пръсти, я отстранява, носейки над пламъка на горелката. Дръжте другите пръсти на една и съща ръка верига, набира си семето, и след това затворете запушалката на флакона. Епруветката със скосени прави линия от агар инокулум, че понижаване до кондензат в долната част на средата и зигзаг движение на материала дозира от скосената повърхност на агара. Като контур уволнен тръби ръб и затвори своята запушалка. Loop стерилизирани в пламъка и се слага в статив. Епруветки с култури вписват, като посочва датата и характера на семена култура (брой проучване или името на културата).

Култури "морава" с помощта на шпатула, за да произвеждат по-агар на хранителни вещества в една чашка на Петри. За тази цел отваряне на капака лявата ръка, или линия пипетира инокулум се прилага върху повърхността на хранителен агар. След това прекарват шпатула през пламъка, той се охлади от вътрешната страна на капачката и потърка материала по повърхността на средата. След инкубиране засяване появява еднакво непрекъснато бактериалния растеж.

Drygalski метод.

■ 1-ви етап. Пресяване на материала по повърхността на твърда хранителна среда, за да се получи изолирани колонии. Може да включва предварително микроскопия на материала

Култури "косачки", за да произвеждат твърда среда растеж в блюдо на Петри. За тази цел отваряне на капака лявата ръка, или линия пипетира инокулум се прилага към повърхността на хранителния агар на метод Drigalski.

фаза 2 проучване на макроскопични и микроскопични колонии и скрининг на колонии, типични за определен вид на наклон или петриева паничка с пресни плочи с агар, за да се получи чиста култура.

■ В резултат на сериен разреждане в петра от материал, избран чашка на Петри на, удобен за броене на колонии

■ броене на колонии

Механични методи:

1. Засяването убождане в агар колона захар.

2. Метод Vigna Veyona: и разтопения ostuzhennym до 50 вземане ° C разследван смесва анаеробна агар култура и засмукан Pasteur пипета, чийто край запечатан. След 24 - 48часа колона агар расте ясно видими колонии от бактерии - анаероби.

3. Методът на Перец. Материалът на теста в 3 тръби с физиологичен разтвор и след това с 3 тръби ostuzhennym до 50 ° C IPA. Епруветките се смесват и се излива в стерилни петриеви блюда 3, на дъното на която се поставя предварително стерилно стъкло, чрез инкубиране на 18-20 часа в инкубатор при стъклени плочи анаероби растат.

Физични методи:

1. анаеробно - създаване на условия на вакуум.

2. апарат Кип му - подмяна на въздуха безразличен газ (водород).

3. Сред Кит Tarotstsi - съдържа парчета на черния дроб с висока адсорбция капацитет, 0,5% от глюкоза. Преди инокулация средата се нагрява на водна баня в продължение на 15 минути, излива се върху слой от вазелин масло за защита на културите от кислород,