КАТЕГОРИЯ:


Астрономия- (809) Биология- (7483) Биотехнологии- (1457) Военное дело- (14632) Высокие технологии- (1363) География- (913) Геология- (1438) Государство- (451) Демография- (1065) Дом- (47672) Журналистика и СМИ- (912) Изобретательство- (14524) Иностранные языки- (4268) Информатика- (17799) Искусство- (1338) История- (13644) Компьютеры- (11121) Косметика- (55) Кулинария- (373) Культура- (8427) Лингвистика- (374) Литература- (1642) Маркетинг- (23702) Математика- (16968) Машиностроение- (1700) Медицина- (12668) Менеджмент- (24684) Механика- (15423) Науковедение- (506) Образование- (11852) Охрана труда- (3308) Педагогика- (5571) Полиграфия- (1312) Политика- (7869) Право- (5454) Приборостроение- (1369) Программирование- (2801) Производство- (97182) Промышленность- (8706) Психология- (18388) Религия- (3217) Связь- (10668) Сельское хозяйство- (299) Социология- (6455) Спорт- (42831) Строительство- (4793) Торговля- (5050) Транспорт- (2929) Туризм- (1568) Физика- (3942) Философия- (17015) Финансы- (26596) Химия- (22929) Экология- (12095) Экономика- (9961) Электроника- (8441) Электротехника- (4623) Энергетика- (12629) Юриспруденция- (1492) Ядерная техника- (1748) Arhitektura- (3434) Astronomiya- (809) Biologiya- (7483) Biotehnologii- (1457) Военни бизнесмен (14632) Висока technologies- (1363) Geografiya- (913) Geologiya- (1438) на държавата (451) Demografiya- ( 1065) Къща- (47672) журналистика и смирен (912) Izobretatelstvo- (14524) външен >(4268) Informatika- (17799) Iskusstvo- (1338) историята е (13644) Компютри- (11,121) Kosmetika- (55) Kulinariya- (373) културата е (8427) Lingvistika- (374) Literatura- (1642) маркетинг-(23702) математиците на (16968) Механична инженерно (1700) медицина-(12668) Management- (24684) Mehanika- (15423) Naukovedenie- (506) образователна (11852) truda- сигурност (3308) Pedagogika- (5571) Poligrafiya- (1312) Politika- (7869) Лево- (5454) Priborostroenie- (1369) Programmirovanie- (2801) производствено (97 182 ) индустрия- (8706) Psihologiya- (18388) Religiya- (3217) Svyaz (10668) Agriculture- (299) Sotsiologiya- (6455) на (42831) спортист строително (4793) Torgovlya- (5050) транспорт ( 2929) Turizm- (1568) физик (3942) Filosofiya- (17015) Finansy- (26596) химия (22929) Ekologiya- (12095) Ekonomika- (9961) Electronics- (8441) Elektrotehnika- (4623) Мощност инженерно ( 12629) Yurisprudentsiya- (1492) ядрена technics- (1748)

Грам оцветяване




Въпрос 3. микроскопични методи за изучаване на живите организми. Darkfield метод микроскопия. Разликата между "тъмно поле" от "затъмнение". Методът на фазово-контрастен микроскоп. Практическо приложение.

Методи за изследване на морфологията на прокариоти

спорове

За изучаване на морфологията на бактериите от тях се подготвят местни (жизнен цикъл) лекарства и фиксирани намазки се оцветява с анилинови бои. Картината се основава на сложни химически и физико-химични реакции. Протоплазма на бактерии, особено в определени петна има афинитет за основни багрила. Ето защо те се използват главно цветни основни багрила: метиленово синьо, кристално виолетово и др vezuvin За да се идентифицират различните структурни елементи в бактериалната клетка, използвана неутрални и кисели багрила ..

Има прости и сложни методи за оцветяване (грам, Ziehl -Nelsenu и др.)

микроскопични техника: лека, фазов контраст, флуоресценция, електронен;

метод култура (бактериологични, вирусологични);

биологичен метод (инфекция на лабораторни животни);

молекулярни генетични методи (PCR - полимеразна верижна реакция)

серологичен метод - откриване на микробни антигени или техни антитела

Приложенията в медицинската практика (не са намерени): идентификация на микроорганизми, ваксини развитие.

Отговор: От всекидневната култура на приготвяне на родните лекарства "висящи капка" (подготовка на стъклото на капака и след това падне до кладенеца на специална пързалка) и "смачкани капка" "(спад на културата + стъклен капак).

1. Микроскопия в тъмно поле на оглед на кондензатора и да пропусне стесни отвора, като по този начин намаляване на интензивността на светлината на лекарството. Наблюдение на движение на бактерии и гъбички и протозои.

2. Darkfield микроскопия. Въз основа на обхвата на наркотици лъчи, простиращи се в наклонена посока, и не попадат в обектива, като областта на оглед тъмно. Обективът включва само тези лъчи, които се отразяват от настоящето в подготовката на микробните клетки, и обикновено тъмен фон са ясно видими ярки светещи обекти в изображението. Осветление на наркотици косо лъчи, генерирани от тъмно-област кондензатор сенчеста от централната част и страничната повърхност на огледалото. Такива забавяния кондензатора централните греди и крайни греди са отразени от повърхността на огледалото, след среща в начина на микробните клетки са признати от тях и попада в обектива. Човек може да види контурите на бактерии, но вътрешната структура не се забелязва. Мобилността с учебна цел (спирохети).

3. Методът на фазово-контрастен микроскоп. Universal метод за микроскопия на живот, неоцветени организми. Една добра резолюция. Основният метод за изследване на Mycoplasma и L-форми. Методът се основава на превръщането на оптични средства фаза колебания в амплитудата (Неоцветен микроорганизми са "фаза" -malokontrastnymi). За фазово-контрастен микроскоп, като се използва конвенционален микроскоп и допълнително фазово-контрастен устройство, както и специални осветителни тела. Резултатът: на светло полезрение, резки изображения могат да се видят на живо, небоядисани предмети добре забележим вътрешна структура и мобилността на микроорганизми. Сега ще разгледаме preperaty кръв.



Въпрос 4. Методи микроскопски препарати от живи и фиксирани бактерии. Микроскопия техника със система за потапяне. Darkfield и фазов контраст микроскопия, микроскопия затъмнена област (характер, предназначение, използване в медицинската практика).

Методите на микроскопски продукти zhyvyh и фиксирани бактерии включват (Виж въпрос 3.):

светло поле микроскопия (разделителна способност от 0.2 микрона микроскоп.)

- Dry (обикновен)

- Immersion (потапяне (натопи) система се използва за микробен предимство разследване на тази система в сравнение с изсъхне е, че между стъклото и обективът да е еднородна (хомогенна) среда (стъкло на наркотици + масло) със същия показател на пречупването следователно падащите лъчи .. без да се подлагат на пречупване и промяна на посоката, да попада в обектива, и по този начин се постига най-доброто покритие на най-малките обекти

▪ Ultraviolet микроскопия (метод на наблюдение в ултравиолетовата (UV) лъчи могат да повишат ограничението за резолюция на микроскопа)

▪ Fluorescent микроскопия (въз основа на използването на луминисцентни явления (флуоресценция, студена светлина) - способността на някои вещества да флуоресцира, т.е. част от секундата, за да абсорбира пада върху тях или късовълнова UV (синьо-виолетови) лъчи, и след това отново се излъчва светлина ...

▪ микроскопия в тъмно поле (вж. Въпрос 3.)

▪ Фаза контраст микроскопия (вж. Въпрос 3.)

▪ Методи за електронна микроскопия (регистриране разсейване ъгли, интензитет на лъчение и енергията на вторични електрони могат да бъдат изследвани не само на повърхността на терена, но и на химическия състав на пробата, и структурата на пробата в повърхностния слой (десетки до стотици нанометри).

Въпрос 5. Прости и сложни техники за оцветяване. Разделяне на сложни техники за оцветяване за други цели. Коректор и диференциращи агенти. Грам оцветяване: природа, етапи рисуване, практическо приложение.

A: прост метод на оцветяване е една (1 -anilinovye боя, магента, тинтява виолетово, метиленово синьо, под формата на разтвори или импрегнирана хартия). Боядисване на 3-5 минути, изплакване, сушене, микроскопия. Можете да получите представа за формата, размера, местоположението (но не в детайли на конструкцията).

Сложните методи многоетапни, различни бои, петна, диференциращи агенти. Сложни методи са:

- Differential - че се разграничат един вид или група от бактерии от друга (Gram - характер на клетъчната стена, Ziehl-Nielsen - устойчиви на киселина).

- Проектирани за откриване на различни структури (spory- включване Orzeszkowa volutin-Neisser, kapsula- Burri-Джинове).

Etch - химични и физични агенти, които повишават оцветителната способност на микроорганизми. Уплътнени цитоплазма и прави цвета по-трайни или разхлабване на клетъчната стена и да се улесни проникването на мастилото в клетката (Lugol разтвор в метода на Грам, карболовата киселина в метода на Ziehl-Nielsen)

Разграничаване на агенти селективно обезцветяват един вид или бактериална клетъчна структура и не се обезцветят друга

(Алкохол в метода на Грам, сярна киселина в метода на Ziehl-Nielsen и Orzeszkowa).

целта метод Откриване на Грам-положителни и Грам-отрицателни бактерии
основният оцветител Карболин тинтява решение виолетово
байц Лугол (след оцветяване) разтвор
диференциране на агент етанол
допълнителна боя разреден разтвор на карбол фуксин
метод на подготовка фиксиране намазка в пламъка на спиртна лампа за оцветяване
етапи за оцветяване Боядисват разтвор на тинтява виолетово за 1 минута. (Или парче хартия - 3 мин.); Нанесете потупване на Лугол разтвор - 1 мин.; Изплакнете в етанол 30 сек.; Измийте с вода; Боядисват решение магента 1 мин. (Или парче хартия - 5 мин.); Измийте с вода; сух
Същността на метода Тя образува комплекс с тинтява тейхоинова киселини в присъствието на Лугол, което е забавило слоести пептидогликан в грам-положителните бактерии. С допълнителен цвят магента отрицателни бактерии стават червени.

1. Въпрос 6. Сложните методи за багрене, байц и диференциращи агенти. Ziehl-Nielsen метод: същност, оцветители етапи, практическо приложение.

A: Сложни методи многоетапни, различни бои, петна, диференциращи агенти. Сложни методи са:

- Differential (изтъкната група (Gram - характер на клетъчната стена, Ziehl-Nielsen метод -kislotoustoychivye).

- Проектирани за откриване на различни структури (spory- включване Orzeszkowa volutin-Neisser, kapsula- Burri-Джинове).

Etch - химични и физични агенти, които повишават оцветителната способност на микроорганизми. Пресован цитоплазма и правя

оцветяване силен или разхлабване на клетъчната стена и да се улесни проникването на мастилото в клетката (Lugol разтвор в метода на Грам, карболовата киселина в метода на Ziehl-Nielsen)

Разнообразяване агенти - вещества селективно обезцветяват един вид или бактериална клетъчна структура и не се обезцветяват други (алкохол в метода на Грам, сярна киселина в метода на Ziehl-Nielsen и Orzeszkowa).

Ziehl-Nielsen метод:

целта метод Откриване на киселина и киселина-бързо бактерии
основният оцветител карбол решение фуксин
байц Карболово киселина (когато оцветяване)
диференциране на агент сярна киселина
допълнителна боя воден разтвор на метиленово синьо
метод на подготовка фиксиране намазка в пламъка на спиртна лампа в процеса на боядисване
етапи за оцветяване Stain разтвор на карбол фуксин (магента Celia) през филтърна хартия с леко нагряване над пламъка на спиртна лампа 3 пъти, докато на бял пара (1); Промива се с 5% сярна киселина; Измийте с вода; Боядисване разтвор на метиленово синьо 1 мин. Измийте с вода; сух
Същността на метода Частична стена хидролиза магента клетка взаимодейства с миколови киселини и образуват комплекс в присъствието на фенол. Фенол е бактериална кожата и разхлабва боята прониква в клетката. -червени Acid, киселинно-бързо - синьо

Практическо приложение: за диагностика на заболявания (туберкулоза)