КАТЕГОРИИ:


Астрономия- (809) Биология- (7483) Биотехнологии- (1457) Военное дело- (14632) Высокие технологии- (1363) География- (913) Геология- (1438) Государство- (451) Демография- (1065) Дом- (47672) Журналистика и СМИ- (912) Изобретательство- (14524) Иностранные языки- (4268) Информатика- (17799) Искусство- (1338) История- (13644) Компьютеры- (11121) Косметика- (55) Кулинария- (373) Культура- (8427) Лингвистика- (374) Литература- (1642) Маркетинг- (23702) Математика- (16968) Машиностроение- (1700) Медицина- (12668) Менеджмент- (24684) Механика- (15423) Науковедение- (506) Образование- (11852) Охрана труда- (3308) Педагогика- (5571) П Arhitektura- (3434) Astronomiya- (809) Biologiya- (7483) Biotehnologii- (1457) Военно дело (14632) Висока технологиите (1363) Geografiya- (913) Geologiya- (1438) на държавата (451) Demografiya- ( 1065) Къщи- (47672) журналистика и SMI- (912) Izobretatelstvo- (14524) на външните >(4268) Informatika- (17799) Iskusstvo- (1338) История- (13644) Компютри- (11121) Kosmetika- (55) Kulinariya- (373) култура (8427) Lingvistika- (374) Literatura- (1642) маркетинг-(23,702) Matematika- (16,968) инженерно (1700) медицина-(12,668) Management- (24,684) Mehanika- (15423) Naukovedenie- (506) образование-(11,852) защита truda- (3308) Pedagogika- (5571) п Политика- (7869) Право- (5454) Приборостроение- (1369) Программирование- (2801) Производство- (97182) Промышленность- (8706) Психология- (18388) Религия- (3217) Связь- (10668) Сельское хозяйство- (299) Социология- (6455) Спорт- (42831) Строительство- (4793) Торговля- (5050) Транспорт- (2929) Туризм- (1568) Физика- (3942) Философия- (17015) Финансы- (26596) Химия- (22929) Экология- (12095) Экономика- (9961) Электроника- (8441) Электротехника- (4623) Энергетика- (12629) Юриспруденция- (1492) Ядерная техника- (1748) oligrafiya- (1312) Politika- (7869) Лево- (5454) Priborostroenie- (1369) Programmirovanie- (2801) производствено (97182) от промишлеността (8706) Psihologiya- (18,388) Religiya- (3217) с комуникацията (10668) Agriculture- (299) Sotsiologiya- (6455) спортно-(42,831) Изграждане, (4793) Torgovlya- (5050) превозът (2929) Turizm- (1568) физик (3942) Filosofiya- (17015) Finansy- (26596 ) химия (22929) Ekologiya- (12095) Ekonomika- (9961) Telephones- (8441) Elektrotehnika- (4623) Мощност инженерно (12629) Yurisprudentsiya- (1492) ядрена technics- (1748)

Б. Изследване на клетъчния имунитет




1. Изследване на повърхностни антигени на Т-лимфоцити. Определяне на повърхностни антигени на Т-лимфоцити чрез поточна цитометрия позволява да се проучи тяхната узряване, диференциация и активиране (виж. Таблица. 18.8 и гл. 2).

2. Стимулиране на ин витро Т-лимфоцити. Нарушения на съзряване и диференциране на Т-лимфоцити с имунна недостатъчност на клетъчния имунитет възникнат на различни нива. Така, в тежък комбиниран имунодефицит нарушен узряването на Т-лимфоцити в тимуса, която се проявява при липса на повърхностни антиген CD2 Т-лимфоцити. При това заболяване също така липсата CD3, CD4 и Т-лимфоцити, неспособност да се синтезира цитокини. Когато голи синдром на лимфоцитите върху мембраната на активирани Т-лимфоцити не са антигени HLA клас II. Когато синдром синдром на Wiskott-Aldrich намалена експресия на CD43 антиген участва в активирането на Т-лимфоцити. Тежки имунодефицитни дефицит на клетъчно-медииран имунитет е придружен от тежка дисфункция на Т-лимфоцити, въпреки че абсолютната и относителната броя на тези клетки може да бъде нормално.

а. За стимулиране на ин витро Т-лимфоцити, като се използват следните материали.

1) митогени - фитохемаглутинин, конканавалин А и т.н. -. Причина неспецифично (не се дължат на свързване към рецепторите антиген разпознаване) активиране на Т-лимфоцити.

2) разтворими антигени - антигени от кандида албиканс, тетаничен токсоид - свързване към антиген-рецептори памет Т-лимфоцити, за да предизвика специфично активиране на тези клетки.

3) алогенни клетки (в смесена лимфоцитна култура) активират Т-лимфоцити, като мечка на антигени си повърхност HLA клас II.

4) антитела към повърхностните антигени на Т-лимфоцити, които участват в тяхното активиране, - CD2, CD3, CD43.

5) химикали, като форбол миристат ацетат (активира протеин киназа С) и йономицин (повишава вътреклетъчния калций).

б. Активирането на Т-лимфоцити обикновено оценява чрез следните индекси.

1) пролиферация.

2) Получаване на цитокини - интерлевкин-2, -4, -5, гама интерферон и тумор некрозис фактор.

3) Изразяване на маркерите за активиране - CD25 и HLA клас II антигени.

4) цитотоксичност.

инча Под действието на митогени, антигени и алогенни клетки, в покой Т-лимфоцити се активират от своя страна и бластни клетки започват да се разделят. Следователно, активирането на лимфоцитите могат да бъдат оценени чрез включване на 3 Н или 14 С-тимидин в ДНК. Лимфоцитна реакция стимулатор варира в зависимост от дозата и продължителността на инкубацията, следователно, преди изследването е необходимо да се изгради нормалните криви на нивото на включване на изотопа стимулант на дозата и времето на инкубиране на лимфоцити. клетките радиоактивност се определя със сцинтилационен брояч и се изразява като брой на минута. Резултатът се оценява от нивото на радиоактивност нестимулирани (спонтанно пролиферация) и стимулирани лимфоцити и индекса на стимулиране (съотношение на радиоактивност стимулирани лимфоцити ниво радиоактивност на нестимулирани лимфоцити). Освен това е възможно да се изчисли съотношението на нивата на радиоактивност пациенти стимулирани лимфоцити и здрав човек. Спонтанно пролиферация на лимфоцитите се увеличава при пациенти, които са имали множество кръвопреливания, пациенти с алергични и автоимунни заболявания, бактериални и вирусни инфекции, както и при новородени.



, В смесена лимфоцитна култура се използва за оценка на способността на Т-лимфоцити разпознават антигени HLA алогенни В-лимфоцити и моноцити. Стимулиране на клетки (алогенни В-лимфоцити) инактивирани чрез облъчване или митомицин. Реакционните лимфоцити от пациенти се оценяват чрез включване в ДНК на белязан тимидин (вж. Ch. 17, стр. II.A.3 и Ch. 20, стр. III.B.2.a).

3. За да се оцени клетъчния имунитет имунизация динитрохлорбензол понякога се използва. Той се прилага интрадермално и само за диагностични цели. Въпреки това, тъй динитрохлорбензол има силно дразнещо и канцероген, изследването се извършва рядко.

4. Биохимични изследвания. За подозира недостатъчност комбиниран хуморален и клетъчен имунитет и определяне на аденозин деаминаза пурин нуклеозид фосфорилаза активност (участва в метаболизма на нуклеозид). Ако атаксия-телангиектазия са почти винаги повишени нива на алфа-фетопротеин в серума, което ни позволява да се разграничат това заболяване от други нервни заболявания. Редките метаболитни заболявания придружени от недостатъчност на клетъчния имунитет включват оротова aciduria и биотин-зависима дефицит карбоксилаза (проявява алопеция, и неврологични разстройства). Когато недостатъчност транскобаламин II (участва в транспортирането на витамин В 12) bystroobnovlyayuschiesya засегнатата тъкан, така че за това заболяване се характеризира с липса на хуморален имунитет, разстройства на хематопоезата (анемия, тромбоцитопения), диария, и забавяне на развитието.

5. Генетични изследвания. При пациенти с тежко увреждане на клетъчния имунитет може химеризъм (наличие на клетки от различни генотипове в едно тяло). Това се случва, когато удари майчината кръв на фетални клетки в кръвта, преливане на кръвни съставки и трансплантация на костен мозък. Ако кръвта на пациента съдържа противоположния пол клетка химеризъм е лесно да се идентифицират, намирането на клетки с мъжки и женски кариотипове. В други случаи, провежда кръв типизиране на HLA клетки от пациента. Това изследване показва също, липсата на HLA клас II антигени върху активирани Т-лимфоцити в синдром изложени лимфоцити.

6. сканиращ електронен микроскоп показва, Т-лимфоцити, които не са на повърхността на микровласинките, което е типично за синдром на Wiskott-Aldrich.

7. биопсия на тимуса се прави в някои случаи за потвърждаване на диагнозата на тежък комбиниран имунодефицит. В недостатъчност на клетъчния имунитет определено retikuloepitelialnyh групи от клетки в тимуса, без Hassall телца и ясна граница между кората на главния мозък и гръбначен мозък, рязък спад в броя на тимоцити. Thymus биопсия извършва хирурзи, притежаващи уреди на тази операция.

8. биопсия на лимфен възел. Когато клетъчен имунен дефицит в биопсия на лимфен възел разкри изпразване paracortical област. Поради риска от инфекция на раната и анестезия усложнения от биопсия на лимфен възел се извършва само когато други лабораторни тестове не позволяват да се потвърди диагнозата.

Б. Изследване на фагоцитите е посочено в хронични и рецидивиращи бактериални инфекции, ако изследването на хуморален и клетъчен имунитет не показва аномалии. Фагоцити недостатъчност може да се дължи на нарушение на миграцията, хемотаксис, адхезия фагоцити, както и нарушения на собствената си фагоцитоза. Освен това, фагоцитите недостатъчност може да се дължи на дефицит на opsonins (антитела и допълни) и нарушена фагоцитарната метаболизъм.

1. Тест нитроблу тетразолиум на възстановяване се прилага при диагностицирането на хронична грануломатозна болест. Същността на метода е, както следва: фагоцити за увеличаване на жълто багрило NBT, обикновено в неговата абсорбция увеличава метаболитна активност на фагоцитите, NBT се намалява, продуктите на тази реакция са оцветени в синьо. Нарушаването на метаболизъм на фагоцитите се съди за намаляване интензивността на син цвят. При идентифицирането на нарушения определят нивото на цитохром b558 фагоцити и други протеини.

2. хемилуминесценция също така ви позволява да се оцени функционалната активност на фагоцитите. Нормалната фагоцитоза, когато има голямо количество на свободни кислородни радикали, които окисляват субстрата, например компоненти на клетъчната стена на бактерии. Окислението се придружава от видима или ултравиолетова светлина радиация. Според интензивността на излъчване може да се съди за функционалната активност на фагоцитите.

3. Оценка на фагоцитарната активност - най-информативен начин да се проучи опсоничната и функционалното състояние на фагоцитите.