КАТЕГОРИИ:


Астрономия- (809) Биология- (7483) Биотехнологии- (1457) Военное дело- (14632) Высокие технологии- (1363) География- (913) Геология- (1438) Государство- (451) Демография- (1065) Дом- (47672) Журналистика и СМИ- (912) Изобретательство- (14524) Иностранные языки- (4268) Информатика- (17799) Искусство- (1338) История- (13644) Компьютеры- (11121) Косметика- (55) Кулинария- (373) Культура- (8427) Лингвистика- (374) Литература- (1642) Маркетинг- (23702) Математика- (16968) Машиностроение- (1700) Медицина- (12668) Менеджмент- (24684) Механика- (15423) Науковедение- (506) Образование- (11852) Охрана труда- (3308) Педагогика- (5571) П Архитектура- (3434) Астрономия- (809) Биология- (7483) Биотехнологии- (1457) Война- (14632) Високи технологии- (1363) География- (913) Геология- (1438) 1065) House- (47672) Журналистика и масови медии- (912) Изобретения- (14524) Чужди езици- (4268) Компютри- (17799) Изкуство- (1338) История- (13644) Компютри- (11121 ) Художествена литература (373) Култура- (8427) Лингвистика- (374 ) Медицина- (12668 ) Naukovedenie- (506) Образование- (11852) Защита на труда- ( 3308) Педагогика- (5571) P Политика- (7869) Право- (5454) Приборостроение- (1369) Программирование- (2801) Производство- (97182) Промышленность- (8706) Психология- (18388) Религия- (3217) Связь- (10668) Сельское хозяйство- (299) Социология- (6455) Спорт- (42831) Строительство- (4793) Торговля- (5050) Транспорт- (2929) Туризм- (1568) Физика- (3942) Философия- (17015) Финансы- (26596) Химия- (22929) Экология- (12095) Экономика- (9961) Электроника- (8441) Электротехника- (4623) Энергетика- (12629) Юриспруденция- (1492) Ядерная техника- (1748) Олимпиада- (1312) Политика- (7869) Право- (5454) Инструменти- ( 1369) Програмиране- (2801) Производство- (97182) Промишленост- (8706) Психология- (18388) Земеделие- (299) Социология- (6455) Спорт- (42831) Строителство- (4793) Търговия- (5050) Транспорт- (2929) Туризъм- (1568) Физика- (3942) ) Химия- (22929 ) Екология- (12095) Икономика- (9961) Електроника- (8441) Електротехника- (4623) Енергетика- (12629 )

В серума. Реагенти. L-γ-глутамил-р-нитроанилид; натриев хлорид; глицил-глицин *; субстрат буферен разтвор *; оцетна киселина




Реагенти . L-γ-глутамил-р-нитроанилид; натриев хлорид; глицил-глицин * ; субстрат буферен разтвор * ; ледена оцетна киселина, разтвор 100 g / l; основен калибрационен разтвор на р-нитроанилид * .

Оборудване . Пипети 0.1; 1.0 и 5.0 ml; термостатна водна баня; спектрофотометър или фотоелектрически колориметър.

Материал . Кръвен серум

Методът се основава на определянето на р-нитроанилид, който се образува от L-y-глутамил-р-нитроанилид с ензимен трансфер на L-y-глутамилов остатък до глицил-глицин.

GTP

г-глутамил-р-нитроанилид + глицил-глицин

г-глутамил-глицилглицид + р-нитроанилин

Курсът на определяне . 0,5 ml от разтвора на субстрата се въвежда в епруветката и се поставя във водна баня при 37 ° С. След 5 минути се добавят 0.05 ml серум, съдържанието се смесва и се инкубира за точно 15 минути при 37 ° С. След това се прибавят 3 ml разтвор на оцетна киселина и се разбърква. Контролната проба също е определена като експериментална, но серумът се добавя след инкубация. Измерено на спектрофотометър при дължина на вълната 410 nm или на PEC при дължина на вълната 400-500 nm (лилав или син филтър) в клетка с дебелина на слоя 10 mm спрямо контролната проба. Цветът е стабилен за няколко часа.

Изчисление. Активността на ензима се изчислява съгласно калибрационната графика.

Регистрация на работата . Съгласно получените екстинкционни стойности, открийте активността на ензима. Въз основа на това, направете заключение за възможността да промените активността в проучвания серум и да посочите предполагаемите причини.

Практическото значение на работата . Клиниката използва определянето на активността на y-глутамилтрансферазата в серума главно при заболявания на черния дроб и жлъчните пътища. Обикновено активността при мъжете е 250-1767 nmol / s · l (15-106 IU), при жени - 167-1100 nmol / s или 10-66 IU. Повишаване на ензимната активност се наблюдава при заболявания на жлъчния тракт със симптоми на обструкция, хепатит, тумори и чернодробни метастази. Трябва да се отбележи, че увеличаването на г-глутамил трансферазата по правило нараства успоредно с активността на алкалната фосфатаза, но активността на у-глутамил трансферазата се увеличава по-рано, остава повишена за по-дълго време и относителното повишаване на ензимната активност е няколко пъти по-високо от алкалната фосфатаза. Трябва да се отбележи, че лекарствата, седативите, етанолът стимулират активността на ензима, който се използва за диагностициране на токсични за алкохола чернодробни заболявания.